凍存細胞需要程序降溫儀

凍存細胞需要程序降溫儀

 程序冷凍儀是一種溫變速率可調的程序控制冷凍系統，廣泛應用于輕工、農、醫、基礎生物研究等各個領域中，用于淋巴細胞、組織庫、骨髓細胞、腫瘤細胞，動、植物細胞、心肌細胞等的凍存。如何用好程序降溫儀，讓珍貴的免疫細胞，干細胞安全降溫，保持活性？

低溫生物學，生物體內水的形態變化：

在0℃到零下60 ℃溫度范圍內，細胞內生命活動較活躍，且六角形冰晶會嚴重損傷細胞膜、細胞器。

在零下80 ℃到零下100 ℃溫度范圍內，細胞內生命活動顯著降低，細胞內會形成方形的冰塊，對細胞膜、細胞器損傷減弱。

在零下130 ℃為水的玻璃化溫度，在此溫度以下，細胞內水結為不定形冰，幾乎不傷害組織細胞膜結構，且細胞內生命活動幾乎*停止。

細胞降溫過程中，降溫速率過快/過慢都會對細胞造成損傷以致影響復蘇活性，降溫過快-細胞內水迅速結晶，對細胞造成冰晶傷害；降溫過慢-細胞壁內外產生滲透壓，造成細胞脫水。降溫的不同階段，采用不同的降溫速率，可有效減少細胞損傷，提高復蘇率。

活細胞降溫方法

1、“經典"次序降溫: +4°C > -20°C十-80C >長期

2、直接放入液氮

3、玻璃化降溫技術

以上三種方法，復蘇后成活率高，但是很難規模化；適用于大體積組胞

4、程序降溫儀:適用于原代細胞，對溫度變化高度敏感的細胞降溫

使用程序降溫儀的原因

提高樣品活性和復蘇率；

過程控制，消除批次實驗中的變數；

樣品保存時間久>10年；

降溫曲線可記錄存檔。

目前市面上常用的程序降溫儀工作原理是，通過微處理器控制系統和電磁閥，控制噴入腔體中的液氮量來控制降溫速率。其優點是：控溫，受外界環境影響小。尤其是處理大體積樣本時，快速噴入的大量液氮更易帶走樣本中的潛熱，從而快速降溫，保證更好的樣本復蘇活性。

程序降溫儀是通過控制噴入腔體中的液氮量來控制降溫速率。一般為先慢凍，后快凍。我們的程序降溫儀主要有六種程序內容，包括2ml凍存管、96孔板、麥管、65-100ml造血干細胞(一)、65-100ml造血干細胞(二)、皮膚組織。這些內容都是經過很多相關方面的專家、教授一起通過實驗研究得出的。

程序降溫儀的優勢：

最新聚氨酯發泡技術，保溫性能好；

側開門設計，存取樣品更方便；

高精度PID控制算法，控溫更精確；

能夠提高樣品的活性和復蘇率；

通過上位機軟件，可以數據連接電腦顯示以及實時打印；

凍存過程實時記錄，井可追溯和打印

CX系列智能程序降溫儀是我公司開發研制成功的智能型冷凍儀。該儀器采用微機控制技術，專用軟件，能較準確地控制液氮的施放量，從而保證被凍存的生物制品以適宜的冷凍速率降溫冷凍。該儀器具有操作簡便、人機界面清楚。

我國臨床低溫醫學工作發展迅速，促進了移植醫學的發展，特別是在骨髓、造血干細胞、皮膚、角膜、內分泌腺體、以及血管和瓣膜等的冷凍保存和移植應用取得了顯著成績。成功的造血干細胞移植依賴于造血干細胞活力的保存。

生物樣品在降溫冷凍過程中，當由液態向固態變化的相變期內會釋放一定熱量，使其溫度回升，不控制降溫速率的冷凍過程將會導致組織細胞死亡。準確地測定生物樣品的相變點，用微機編制降溫程序，以便在樣品相變時加大液氮輸入量，克服相變樣品溫度的回升，使細胞安全而迅速地度過相變期，這是提高被凍樣品成活率的關鍵環節。